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flytime1115

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[求助] 有木有人做过Taqman 探针法Real-Time？？已有1人参与

我要检测基因组中插入的某个外源片段的拷贝数，需要做绝对定量。师兄建议不要用sybr 燃料做，建议用探针法做。现在毫无头绪，不知道怎么设计，怎么合成？望各位高人指点一下……

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1楼 2011-12-22 16:26:31

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flytime1115

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引用回帖:

楼: Originally posted by sandisk411 at 2011-12-24 12:11:26:
TaqMAN法和SYB法都可以用于检测拷贝数，关键是你能不能设计出合适的探针。用RT-PCR法鉴定拷贝数需要你对材料非常了解，比如是转基因T0代，如果是单拷贝的，插入目的基因与参考基因（基因组里单拷贝）的比值应是1: ...

你后来建议的方法是genomic walking。可以做，我也正在尝试，可是这种方法还没有达到测出拷贝数的水平，技术有待提高。你说的遗传背景我不是很懂。希望您能再说的清楚一些，你说的单拷贝是什么意思，我不知道我的目的基因是几拷贝我才要测拷贝数呀？你说的“如果是单拷贝”指的是什么？