24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2143  |  回复: 3

ann花开花落

铜虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量扩增效率低怎么办

最近在做荧光定量标准曲线,以人基因组DNA为标准品,发现扩增效率只有70%多,后来优化酶、探针,扩增效率还是低,换外控引物后有97%,但是换我们所在的外显子上的引物后扩增效率还是80%多,请问到底是标准品还是引物的问题导致扩增效率低呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励应助! 2011-12-13 18:49:59
应该是引物问题,如果是标准品问题,其实可以用PCR产物回收纯化后做PCR,如果这还有问题一般都是引物或者体系问题

感觉体系,例如酶是哪个公司的,反应温度时间等,如果是DNA注意多变性一会,另外产物多大?
2楼2011-12-13 13:45:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
ann花开花落(金币+3): 我们得出的结论也是模板里有抑制剂 2011-12-15 14:26:13
也有可能是模板里面还有抑制PCR的东西,试试把模板稀释10倍和100倍结果如何吧。

[ Last edited by 西瓜 on 2011-12-14 at 16:14 ]
3楼2011-12-13 18:50:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张晓洁

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我的扩增效率一直高于105 不知道是不是引物设计出了问题
每一发奋努力的背后必有加倍的赏赐
4楼2011-12-13 23:07:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ann花开花落 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +4 m永o不v言o弃m 2026-04-09 4/200 2026-04-10 11:30 by asy1wn
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 284求调剂 +18 梵@@ 2026-04-06 18/900 2026-04-10 10:12 by may_新宇
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 一志愿华工085600 331分 +6 天下ww 2026-04-09 6/300 2026-04-09 18:59 by l_paradox
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +10 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 12/600 2026-04-09 16:18 by lin-da
[考研] 322求调剂,08工科 +3 今天是个小号 2026-04-08 3/150 2026-04-09 15:53 by wp06
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二!! 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 考研调剂 +11 小sun要好运 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:02 by qlm5820
[考研] 26调剂 086003 +6 失活的细胞 2026-04-04 6/300 2026-04-04 09:50 by zhangdingwa
信息提示
请填处理意见