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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

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[求助] 用过pET28a(+)表达载体的高人请指教

本人合成了一段全基因序列，连接表达载体pET28a(+)，因为第一次做，错误的选择了EcoR1和Hind3作为酶切位点（红色标记），这样表达出的目的蛋白就会带有大量的载体氨基酸（蓝色框），影响活性。不知道哪位高人能够指点一些，该怎样处理才能保证蛋白活性？谢谢！！

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1楼2011-12-12 15:29:11

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金书豆豆

木虫 (小有名气)

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专业: 微生物生理与生物化学

引用回帖:

3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-12 16:17:44
先做了看看活性，没有活性的话重新构建，换酶切位点NcoI（也会多两个氨基酸），或者换载体。

为什么不会选HindIII?

30楼2012-06-19 11:50:25

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