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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有用过transgen 的t1载体的吗
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syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 有用过transgen 的t1载体的吗

之前一直用pmd19 t 因为这次片段有2500 连不上去 所以就换了transgen 的pEASY-T1 载体 说明书上说25摄氏度20min就可以了 我的是高GC片段 建议37℃连接20min 说是连接时间超过30min就会使连上去的片段从载体上脱落
以前做都是16度反应过夜 这次时间这么短没有做过 不知道有谁试过没？效果如何？PS.我的片段浓度挺高的
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1楼 2012-08-16 14:45:40
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syn1985

木虫 (正式写手)
好着急啊 怎么没有人回复呢
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2楼2012-08-16 16:28:53
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
syn1985: 金币+5, ★有帮助 2012-08-20 08:53:53
我建议楼主用4度过夜，效果比较好，我以前都是4度过夜的
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3楼2012-08-16 16:34:50
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syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by woshizhufeng at 2012-08-16 16:34:50
我建议楼主用4度过夜，效果比较好，我以前都是4度过夜的

我听说过4度过夜 不过一直都做16度过夜的 你是用的transgen的t载体吗？
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4楼2012-08-17 14:07:42
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by syn1985 at 2012-08-17 14:07:42
我听说过4度过夜 不过一直都做16度过夜的 你是用的transgen的t载体吗？...

用的promega的载体，感觉不错
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5楼2012-08-17 17:29:39
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
syn1985: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-08-20 08:53:18
transgen 的pEASY-T1  是基于拓扑酶技术做的，不需要T4连接酶，这些在说明书里都有介绍。对于这个载体，我用过一盒，我感觉不太稳定，且回收产物浓度低时 载体自连很多。我只能给个评价：一般，可用。
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6楼2012-08-17 19:24:40
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churchill87426

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
syn1985: 金币+5, ★有帮助 2012-08-20 08:53:36
用过连2600的片段，没连上。。还是用普通的pGEMT Easy好点。
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7楼2012-08-19 11:15:12
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zhangj0754

木虫 (小有名气)
我用的还挺好的。
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8楼2012-08-19 12:38:14
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