应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于PCR无结果的原因
211/3返回列表123下一页
查看: 3414  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Icityman

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR无结果的原因

最近跑的PCR一直不是很顺利，采用的体系和程序都是参照师兄师姐的，自己设计了不同梯度的退火温度，但结果还是没有，除了拖尾还是拖尾，怎么改进优化，请各位高手好心人帮忙解决啊！谢谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-06 10:08:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
Icityman(金币+1): 2011-12-06 10:49:34
1949stone(金币+1): 水一般不会吧 2011-12-06 11:37:55
1.你呢样品没有问题吧，不行换一下
2.看看引物怎么样，是不是不合理还是怎么回事
3.水是不是污染了，换新的看看吧
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-12-06 10:18:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Icityman

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbwalkman at 2011-12-06 10:18:08:
1.你呢样品没有问题吧，不行换一下
2.看看引物怎么样，是不是不合理还是怎么回事
3.水是不是污染了，换新的看看吧

这个。。样品是师姐给的，引物时我参照codehop自己设计出来的，照讲有拖尾就应该是扩增出来了啊，水污染的可能性比较小吧
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-06 10:51:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiali-yu

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 后一个 估计一般同学不会犯 2011-12-06 11:38:33
Icityman(金币+9): 1 2011-12-07 10:01:02
模板浓度你知道不？如果模板浓度过高，pcr也不会出来产物，还有就是引物前后向浓度是否一致也会对结果有影响，建议用大公司合成隐物

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-12-06 10:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

A406

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+5): 鼓励新虫友发帖！ 2011-12-06 14:52:51
个人觉得拿来的样品，引物，程序等自己先进行下确认，这些是否是你要的，模板是否符合PCR，设个质粒的阳性对照，引物会不会是按CDNA设计的而你用基因组当模板？我们实验室就出现过这种低级错误，
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-12-06 13:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈小菡

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-06 22:57:05
拖尾现象是由于支持介质的表面对被分离的样品有一定的吸附作用，使分离样品滞留而降低了电泳速度。我个人觉得更新一下电泳缓冲液，不知道对不对。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-12-06 16:05:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

julietguo

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎常来哦 2011-12-06 22:57:21
模板、引物和dNTP反复冻融会影响PCR扩增效果的，你要不要换个新的模板试试？
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-12-06 16:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robert1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励交流经验 2011-12-06 22:57:30
延长一下延伸的时间试试，我也不知道为什么，不过上次这么处理了之后好很多，可以尝试一下。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-12-06 22:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先，先看看你的模板DNA是否降解了。然后，再检查下你所用的PCR反应的东西是否变质了。如果上面两个都没有问题，那么你可以试着降低退火的温度，但是也不能降得太低了。
赞一下 回复此楼
9楼2011-12-06 22:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

情系石河子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看看引物是不是 合适
赞一下 回复此楼
吃地苦中苦，方为人上人
10楼2011-12-07 09:32:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Icityman 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭