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RT-PCR扩增图和溶解曲线跑成这样
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月之光羽
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RT-PCR扩增图和溶解曲线跑成这样
各位虫友,
最近做RT-PCR,扩增图和溶解曲线跑成这样,我的退火温度为57度,不知道怎么回事,同样的条件,其它的做的挺好的,就是这几个样是这样,求帮忙!
扩增
溶解曲线
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2011-11-20 20:20:09
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晓风残月cl
新虫
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★
月之光羽(金币+1): 谢谢参与
你还是先用普通PCR扩试一下 看看能否扩的出来 退火是否合适 有没有二聚体
这样盲目的做 荧光试剂很贵的
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8楼
2012-04-26 15:22:33
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blackrose8089
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★
月之光羽(金币
+1
):谢谢参与
如果模板都一样的话,机子没问题,应该是引物的事情。
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2楼
2011-11-20 21:33:50
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wuyucool
铁杆木虫
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★
月之光羽(金币
+1
):谢谢参与
看一下转录组数据,这几个基因表达的情况如何? 引物做PCR结果如何?
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3楼
2011-11-20 21:46:05
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月之光羽
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2楼
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Originally posted by
blackrose8089
at 2011-11-20 21:33:50:
如果模板都一样的话,机子没问题,应该是引物的事情。
我做了6个模板,同时做了6个基因,其中第2个模板的都是这种情况,并且都没有给出CT值,还有两个模板的3个基因也是这种情况,另外的都很好,剩下3个模板的6个基因都很好,所以引物估计没问题,是退火温度还是其它?
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4楼
2011-11-20 21:56:59
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