24小时热门版块排行榜

南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

应助: 4 (幼儿园)
金币: 2626.3
红花: 1
帖子: 67
在线: 11.1小时
虫号: 1261648
注册: 2011-04-11
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 提基因组的问题

用酚氯仿法提一个曲霉基因组，最后用TE溶沉淀时感觉很稠，并且有点淡黄，用未稀释的和稀释30倍的分别跑电泳，结果未稀释的是长长的亮带，稀释的有一条带，但是大小比基因组的要小，如图，前孔是未稀释的，后面一个是稀释的。已经提了三次了，都差不多这样，求解释。。。

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有290人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]

1楼2011-11-18 21:32:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

MolEPI: 7
应助: 75 (初中生)
金币: 690.2
红花: 8
帖子: 340
在线: 97.2小时
虫号: 1473815
注册: 2011-11-03
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 有道理! 2011-11-19 18:41:40

稀释的那处应该比23k也没小多少吧？下次点近一点Marker,建议用0.6%的胶。4-5V/cm，电泳1小时。
从你电泳图来看，有两个问题，
1.产量太高了。
2.有RNA污染。

建议：
1.不用这么多样品量提取，或者最后溶解后再稀释。样品量有时并不是用得越多越好。特别如果样品本身含有丰富的核酸酶时，如果用很多的样品导致裂解液不足以抑制内源性的核酸酶，那得不偿失。适量！
2.从你稀释的样品来看，23k位置有一条带，是DNA条带。下面的是还没有降解完全的RNA。如不是你所用样品量过多，那就是此霉RNA含量丰富，再要不就是你的RNase活性不足或温育时间不够。