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林夕梦

木虫 (文坛精英)

珊瑚岛碧落堂主~~

[求助] 3.7Kb片段基因与7Kb载体的质粒构建

如题,基因片段3.7Kb载体7Kb,Phage载体。
连接了几次都失败了。要么转化后没有长出克隆,要么长出来也是假阳性,小提质粒后酶切片段大小不对额
大片段不好连呢,求高手指教有妙招改进么??
(转化采用的超级感受态细胞,42度30s)
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许多奇迹,我们相信,才会实现……
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囧囧俏

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
43楼: Originally posted by 林夕梦 at 2012-02-10 14:57:22
偶的后来成功了呢,多试试,多改进,加油哈...

请问楼主你的体系是什么 能否透露一下 我也做大片段连接但最近一直未连上,每次挑取的克隆差不多都是自连,难道要把长得克隆都提质粒鉴定一遍?这样岂不是很浪费
45楼2013-10-10 15:34:50
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