| 查看: 1865 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
全血基因组的提取问题
|
||
|
我昨天用axygen的全血基因组提取试剂盒提了20多个血液样本，因为时间来不及，就分装了20ul放在4℃冰箱里今天下午来跑胶，结果虽然都在20kbp左右，但是除了个别以外，条带都很暗，很勉强看得到一点，即使看得到的也都很细稀释50倍的浓度根本测不出来。我看了我师兄的毕业论文，他也是用的axygen的试剂盒，但是他的条带都很亮，浓度有20~30ng/ul，我是第一次做这个，实验室其他人也都没有做这方面的，想请问一下问题出在哪里呢？ 我用的是EDTA K2的抗凝全血，在医院4度冰箱已经放了一天了，拿回来的时候已经分层，我上下颠倒混匀后吸取的250ul的体积进行抽提。加AP2后涡旋至整管由暗红色变成棕色泥浆状，最后65℃TE加了140ul，不知道是不是有点太多了。跑胶用的0.7%，90V，45min 请大家帮忙看看问题会在哪里吧，谢谢大家！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有207人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关提取全血DNA和RNA问题。
已经有4人回复
- 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)
已经有10人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 基因组提取过程中加入溶菌酶有白色沉淀
已经有13人回复
- 酵母 基因组提取问题
已经有8人回复
- -20℃保存的全血DNA标本，可以保存多长时间就要提取DNA？
已经有10人回复
- 放线菌基因组DNA提取后，用TE不溶！！？
已经有20人回复
- 全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用无菌注射用水代替？
已经有16人回复
- 【求助/交流】关于提取基因组DNA过程中遇到的难题
已经有10人回复
- 【求助/交流】提取的植物基因组DNA电泳图，疑问？？？
已经有17人回复
7楼2011-11-14 14:25:40
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): 鼓励新朋友回帖应助！谢谢！ 2011-11-14 16:26:51
古韵清音(金币+4): 谢谢，以后遇到问题希望还能向你请教 2011-11-14 16:57:34
wanhscn(金币+4): 鼓励新朋友回帖应助！谢谢！ 2011-11-14 16:26:51
古韵清音(金币+4): 谢谢，以后遇到问题希望还能向你请教 2011-11-14 16:57:34
|
200ul 血液（人）的DNA产量约5-10ug。人不一样产量不一样。 稀释50倍测不了那你使用原液测呗，NanoDrop可以直接使用1ul的样品测的，你看哪有使用此仪器的。你稀释50倍才测的估计是老式的紫外，使用比色杯的。 EDTA抗凝血没有问题。4度冰箱放一天不至于影响血液DNA的提取，虽然比起新鲜血液产量稍低一点点。 血液提取（你是使用硅胶柱还是异丙醇沉淀？）关键地方在消化这一步骤上。要确保充满消化，使其DNA释放出来。 |
2楼2011-11-13 14:31:08
3楼2011-11-13 14:32:36
4楼2011-11-13 20:41:11
20