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PCR扩增问题
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一凡8665
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PCR扩增问题
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大家好!我初次做PCR扩增一个细菌的16Sr DNA,引物和扩增条件都是按照文献来的,但是奇怪的是PCR结束后电泳发现,引物和模板没有结合,这是什么原因呢?谢谢大家的释疑!
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1楼
2011-11-03 20:31:41
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3楼
:
Originally posted by
zhfge
at 2011-11-03 23:22:23:
好吧,你检测过模板么?
你好!检测过,不过有点断裂,情况不严重。
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11楼
2011-11-04 13:12:50
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7楼
:
Originally posted by
wjgang728
at 2011-11-04 09:53:02:
你怎么确定引物和模板没有结合呢?基于什么来确定的?
你好!因为PCR后跑胶发现除了marker外的亮带都在最前面。
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12楼
2011-11-04 13:14:18
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6楼
:
Originally posted by
longrna
at 2011-11-04 09:41:00:
非常奇怪LZ怎么看得出是模板与引物没有结合的呢?
会不会是PCR本身的问题?是否有做阳性及阴性对照。
没做对照。
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13楼
2011-11-04 13:15:16
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10楼
:
Originally posted by
imyting
at 2011-11-04 12:07:39:
P不出来的原因太复杂了,不同的人做,条件一样可能都做不出来,这种事情还是自己摸索的好。大家的意见只能是参考,毕竟自己的事只有自己最清楚^^我也经常遇到这种情况啊
谢谢!
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14楼
2011-11-04 13:15:56
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