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一凡8665

金虫 (小有名气)


[交流] PCR扩增问题

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大家好!我初次做PCR扩增一个细菌的16Sr DNA,引物和扩增条件都是按照文献来的,但是奇怪的是PCR结束后电泳发现,引物和模板没有结合,这是什么原因呢?谢谢大家的释疑!
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一凡8665

金虫 (小有名气)


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3楼: Originally posted by zhfge at 2011-11-03 23:22:23:
好吧,你检测过模板么?

你好!检测过,不过有点断裂,情况不严重。
11楼2011-11-04 13:12:50
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一凡8665

金虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by wjgang728 at 2011-11-04 09:53:02:
你怎么确定引物和模板没有结合呢?基于什么来确定的?

你好!因为PCR后跑胶发现除了marker外的亮带都在最前面。
12楼2011-11-04 13:14:18
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一凡8665

金虫 (小有名气)


引用回帖:
6楼: Originally posted by longrna at 2011-11-04 09:41:00:
非常奇怪LZ怎么看得出是模板与引物没有结合的呢?

会不会是PCR本身的问题?是否有做阳性及阴性对照。

没做对照。
13楼2011-11-04 13:15:16
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一凡8665

金虫 (小有名气)


引用回帖:
10楼: Originally posted by imyting at 2011-11-04 12:07:39:
P不出来的原因太复杂了,不同的人做,条件一样可能都做不出来,这种事情还是自己摸索的好。大家的意见只能是参考,毕竟自己的事只有自己最清楚^^我也经常遇到这种情况啊

谢谢!
14楼2011-11-04 13:15:56
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