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构建质粒，但从质粒中扩增基因老p不出来。。急呀！！求帮助~~
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最近在构建质粒，想从一个带有目的基因的质粒中PCR出目的基因，可是跑出来的条带都不是我想要的，目的基因1200bp，扩出来的有250、600、大于3000bp的，因为上游引物可以跟基因中间的序列连续5个碱基配对，所以又质粒上的序列设计了一段引物，但还是没有目的条带。 原本是打算从质粒上酶切下目的基因，但是双酶切一直切不成功，做过单酶切都没有问题，质粒一直构建不成功，急呀！！！ |
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