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sunqinyan

金虫 (小有名气)

[求助] 构建质粒,但从质粒中扩增基因老p不出来。。急呀!!求帮助~~

最近在构建质粒,想从一个带有目的基因的质粒中PCR出目的基因,可是跑出来的条带都不是我想要的,目的基因1200bp,扩出来的有250、600、大于3000bp的,因为上游引物可以跟基因中间的序列连续5个碱基配对,所以又质粒上的序列设计了一段引物,但还是没有目的条带。
原本是打算从质粒上酶切下目的基因,但是双酶切一直切不成功,做过单酶切都没有问题,质粒一直构建不成功,急呀!!!
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