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xuhua257

木虫 (小有名气)

[求助] 有关RT-PCR内参基因

最近做为新手,开始做RT-PCR,自己设计的引物。做了两次PCR后,发现内参基因没有扩出来,另外一个基因倒是跑出来了,我做的原料是青花菜,退火温度是50℃。希望高手们帮我分析下。万分感谢!
图在附件中。
前面4个泳道是Actin, 第5道是marker, 后面是扩出来的青花菜的基因。
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银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xuhua257(金币+10): 是同一模板 可能是引物不合格吧 另外一个基因都扩出来了 说明RNA没有降解啊 谢谢了! 2011-10-21 11:19:45
xuhua257(金币+10): 2011-11-18 14:43:35
个人认为:引物不合格,重新设计。
内参极好P,没有一点带只能说明引物的问题。
1.引物设计问题。
2.靶基因序列错误。

PS.都用的同一模板?RT前确认RNA没降解,反转录没问题。
2楼2011-10-21 09:02:46
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