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hgq115

金虫 (小有名气)


[交流] 关于PCR退火温度

PCR引物设计的时候,用不同的软件设计会发现同一个引物的Tm值相差比较大,与用4(G+C)*2(A+T)获得的结果也不同。请问各位虫友在设计的时候是如何确定引物的Tm值的?
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suzy150

新虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
先通过软件设计引物 实验中的退火温度用软件中显示的Tm值-5度 若P不出来 就做温度梯度 一般50-70度就可以了
17楼2011-10-21 17:33:33
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查看全部 18 个回答

lixg

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
hgq115(金币+1):谢谢参与
adslye(金币+2): 鼓励交流,TM计算公式不同而已,没有对错。 2011-10-21 08:54:35
利用软件引物,实际Tm值以公司的报告为准。
2楼2011-10-20 09:50:22
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sunqinyan

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
hgq115(金币+1):谢谢参与
adslye(金币+2): 鼓励交流! 2011-10-21 08:54:45
primer 5.0设计的时候就会给
3楼2011-10-20 10:38:27
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
hgq115(金币+1):谢谢参与
adslye(金币+2): 鼓励交流!55王道~ 2011-10-21 08:55:03
跑PCR的时候一律55度的飘过....
4楼2011-10-20 11:30:06
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