24小时热门版块排行榜    

查看: 3207  |  回复: 17
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hgq115

金虫 (小有名气)


[交流] 关于PCR退火温度

PCR引物设计的时候,用不同的软件设计会发现同一个引物的Tm值相差比较大,与用4(G+C)*2(A+T)获得的结果也不同。请问各位虫友在设计的时候是如何确定引物的Tm值的?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
hgq115(金币+1):谢谢参与
adslye(金币+2): 鼓励交流!55王道~ 2011-10-21 08:55:03
跑PCR的时候一律55度的飘过....
4楼2011-10-20 11:30:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

lixg

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★ ★
hgq115(金币+1):谢谢参与
adslye(金币+2): 鼓励交流,TM计算公式不同而已,没有对错。 2011-10-21 08:54:35
利用软件引物,实际Tm值以公司的报告为准。
2楼2011-10-20 09:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqinyan

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
hgq115(金币+1):谢谢参与
adslye(金币+2): 鼓励交流! 2011-10-21 08:54:45
primer 5.0设计的时候就会给
3楼2011-10-20 10:38:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuhedong1817

木虫 (正式写手)



hgq115(金币+1):谢谢参与
hgq115(金币+4): 2011-10-20 14:15:53
adslye(BioEPI+1): 对的,就是这个道理。只是公式不同,无对错之分。 2011-10-21 08:55:44
根据查找的文献发现,计算Tm值的至少有20几个公式,而且也没有通用的公式,但是大多数相差都在10℃范围内。所以,只要你根据引物合成公司提供的Tm值,然后根据Tm+5,Tm-5这个数值范围,做一个退火温度梯度,然后根据PCR的条带浓度大小,就可以得到较准确的退火温度了。
6楼2011-10-20 12:33:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +8 啊我我的 2026-03-11 8/400 2026-03-16 17:23 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +7 曦熙兮 2026-03-15 7/350 2026-03-16 16:34 by houyaoxu
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[教师之家] 焦虑 +7 水冰月月野兔 2026-03-13 9/450 2026-03-16 10:00 by Quakerbird
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
信息提示
请填处理意见