应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于SDS-PAGE电泳问题
51/1返回列表
查看: 4800  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zyx335588

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] 关于SDS-PAGE电泳问题

最近跑SDS_PAGE总是出现拖尾现象，在浓缩胶时跑的挺正常的，但到分离胶后溴酚蓝条带便变的非常宽，考马斯亮蓝热色脱色后见图片，请各位高手帮忙分析一下原因。
电泳条件是：电压浓缩胶80V，分离胶160V；甘氨酸缓冲液为5倍母液稀释；制胶的30%的丙烯酰胺及TEMED为10个月前购买的伯乐产品，浓缩胶1M Tris pH 6.8，分离胶1.5M Tris pH 8.8，10% 过硫酸铵等其他溶液均为新配制，所用电泳仪为伯乐迷你电泳仪。

第一幅图的前两个泳道为菌体加热处理后的样品
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-11 10:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

第一，你的上样量太大了，超过了胶孔的承受力；第二，SDS-PAGE电泳前要将样品在沸水浴中煮5分钟，煮后要离心，离心后最多吸80%体积的上清，取出来的上清再离心，离心后得到的上清再用于SDS-PAGE，效果会很好
赞一下 回复此楼
天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
5楼2011-10-11 15:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

18853850850

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-10-11 14:42:51
zyx335588(金币+5): 2011-10-15 15:32:56
1.那前两个样品上样量太大
2.分离胶不要用太大电流，用120就行，越大，你的样品制的不好的话，或者是胶本身有问题的话，就越容易拖尾。
3.最有可能的是胶的问题了，具体是哪一部分就得你自己实验来验证了，我以前也遇到过这种问题，换了别人配的试剂就没事了，别外丙烯酰胺不能放过久，祝你好运！
赞一下(2人) 回复此楼
学自己想知道的
2楼2011-10-11 12:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuiyoutian88

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 热心虫友，欢迎常来 2011-10-11 14:43:06
上样量过大，或者是电压过大，你试试低电压和小上样量。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-11 13:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

1.前几个样品很粗，同时发生扭曲，是上样量太大且盐度不一造成的
2.分离胶不要用太大电流。
3.分离胶后溴酚蓝条带便变的非常宽，最可能的原因是浓缩胶太短，样品没得到很好聚集。或因为浓缩胶pH不准，测之检查。
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-11 15:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:21 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +3 process2012 2026-08-23 4/200 2026-08-23 12:54 by huixian257
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭