24小时热门版块排行榜    

查看: 2195  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lilylove170

新虫 (小有名气)

[求助] sal 及 sph 两个酶切位点用过的请指教

5- GTAAGCATGCGGAGGAAAGTAGTTATGACTGAT -3(SphⅠ)
5- TGCGGTCGACACTTTAGACAGTATACACG -3(SalⅠ)
rt
上面的引物中保护碱基及酶切位点没有错误吧?说什么都连不上,谢谢 好心人帮助
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lushan_ds

新虫 (初入文坛)

可以分两次单酶切 效果可能会好一些
5楼2014-12-22 19:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-10-08 08:04:20
lilylove170(金币+1): 2011-10-08 19:32:20
序列设计的没问题
SalⅠ这个酶貌似效率不是很高,还有我记得这个好像酶和甘油的比例比较高,具体好像是因为甘油会导致酶切的专一性发生变化。所以你在酶切体系里面应该尽量少给点酶,然后通过延长反应时间来弥补。另外你要是怕保护碱基不怎么给力可以考虑连T载然后双酶切。
可以用QQ找我……
2楼2011-10-08 00:02:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilylove170

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红多多 at 2011-10-08 00:02:45:
序列设计的没问题
SalⅠ这个酶貌似效率不是很高,还有我记得这个好像酶和甘油的比例比较高,具体好像是因为甘油会导致酶切的专一性发生变化。所以你在酶切体系里面应该尽量少给点酶,然后通过延长反应时间来弥补 ...

您说的很有道理,我最后也是按照这样的思路来改进的,等待明天的结果,bless
3楼2011-10-08 19:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzqno

金虫 (小有名气)


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-08 20:28:22
也有可能是你的双酶切buffer不合适,问问技术顾问有没有通用的双酶切buffer,胶回收效率有没有考虑过??浓度太低也是不容易连接的
4楼2011-10-08 19:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料类求调剂 +5 wana_kiko 2026-02-28 5/250 2026-02-28 20:27 by lwk2004
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 284求调剂 +3 天下熯 2026-02-28 3/150 2026-02-28 20:14 by 公瑾逍遥
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 5/250 2026-02-28 20:11 by iwuli
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 材料学调剂 +4 提神豆沙包 2026-02-28 4/200 2026-02-28 18:26 by houyaoxu
[教师之家] 版面费该交吗 +15 苹果在哪里 2026-02-22 18/900 2026-02-28 18:20 by mibaomingg
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂;
[考研] 材料调剂 +3 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 3/150 2026-02-28 18:06 by houyaoxu
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考博] 26申博 +3 想申博! 2026-02-26 3/150 2026-02-28 16:07 by nxgogo
[考研] 290求调剂 +4 材料专硕调剂; 2026-02-28 5/250 2026-02-28 13:32 by houyaoxu
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 什么是人一生最重要的? +10 瞬息宇宙 2026-02-21 10/500 2026-02-27 08:46 by tfang
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见