应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » sal 及 sph 两个酶切位点用过的请指教
51/1返回列表
查看: 2197  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lilylove170

新虫 (小有名气)

[求助] sal 及 sph 两个酶切位点用过的请指教

5- GTAAGCATGCGGAGGAAAGTAGTTATGACTGAT -3（SphⅠ）
5- TGCGGTCGACACTTTAGACAGTATACACG -3（SalⅠ）
rt
上面的引物中保护碱基及酶切位点没有错误吧？说什么都连不上，谢谢 好心人帮助
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-07 21:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzqno

金虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-08 20:28:22
也有可能是你的双酶切buffer不合适，问问技术顾问有没有通用的双酶切buffer，胶回收效率有没有考虑过？？浓度太低也是不容易连接的
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-10-08 19:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-10-08 08:04:20
lilylove170(金币+1): 2011-10-08 19:32:20
序列设计的没问题
SalⅠ这个酶貌似效率不是很高，还有我记得这个好像酶和甘油的比例比较高，具体好像是因为甘油会导致酶切的专一性发生变化。所以你在酶切体系里面应该尽量少给点酶，然后通过延长反应时间来弥补。另外你要是怕保护碱基不怎么给力可以考虑连T载然后双酶切。
赞一下(2人) 回复此楼
可以用QQ找我……
2楼2011-10-08 00:02:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilylove170

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红多多 at 2011-10-08 00:02:45:
序列设计的没问题
SalⅠ这个酶貌似效率不是很高，还有我记得这个好像酶和甘油的比例比较高，具体好像是因为甘油会导致酶切的专一性发生变化。所以你在酶切体系里面应该尽量少给点酶，然后通过延长反应时间来弥补 ...

您说的很有道理，我最后也是按照这样的思路来改进的，等待明天的结果，bless
赞一下 回复此楼
3楼2011-10-08 19:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lushan_ds

新虫 (初入文坛)
可以分两次单酶切 效果可能会好一些
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-22 19:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂； 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +6 wana_kiko 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:20 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[教师之家] 版面费该交吗 +15 苹果在哪里 2026-02-22 18/900 2026-02-28 18:20 by mibaomingg
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭