| 查看: 4866 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
微信指数没变化，科研之友没阅读
已经有4人回复
-
这种情况还有戏吗
已经有9人回复
-
同事接到电话了，我却没有
已经有4人回复
-
准备明年的基金了
已经有5人回复
-
今年的WR进展到哪一步了？
已经有6人回复
-
时间戳他又来了
已经有11人回复
-
小木虫看见有人已经知道结果了
已经有15人回复
-
这个自发加氧反应的机理是什么？
已经有6人回复
-
J-J-W不为人知的一面
已经有18人回复
-
没消息就是被刷了呗
已经有13人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
今年面上没有消息，想来是没了，散个金攒攒人品，为明年祈福
+1/638
-
浙江理工大学能源催化团队诚聘专职教师/博士后
+2/214
-
西湖大学拓扑光学、非厄米光学、太赫兹方向博士后招聘（长期有效）
+5/135
-
西湖大学物理学、光学、电子信息方向博士生招生（长期有效）
+5/120
-
华东理工大学 生物反应器工程全国重点实验室 博士后招聘
+1/94
-
具有超高耐腐蚀性的铝合金阳极氧化后处理工艺
+1/89
-
★★★中山大学（深圳）院士团队招收27届推免硕士生（低维材料与器件方向）
+1/88
-
中国特种设备检测研究院招聘1名高温涂层方向博士后
+2/56
-
招收博士后（神经退行性疾病、认知障碍疾病）
+1/41
-
西安交通大学补亚忠课题组招收申请考核制博士生
+2/26
-
深圳大学 招收2027级推免研究生 (金属材料/ 3D打印/ 氢能等方向)
+1/26
-
诚征女友( 西安 )
+1/25
-
武汉大学海优团队博士生招聘（微纳光子学与集成光子学）
+5/25
-
新西兰坎特伯雷大学招博士后
+1/7
-
大家有research gate的账号吗？有偿借用
+1/4
-
中山大学孙逸仙纪念医院潘越教授团队招聘博士后和科研助理
+1/3
-
国家自然科学基金申报者发榜前心理状态调查，麻烦帮忙填一下哇！
+2/2
-
中科院大连化物所诚聘博士后/科研助理/项目聘用人员
+1/2
-
PEMFC耐久数据合作
+2/2
-
中山大学招收2027级硕士研究生（增材制造/机器学习）
+1/1
9楼2011-10-05 20:10:50
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32