| 查看: 4802 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
今年E04面上
已经有18人回复
-
2026年面上项目中了，2A+B, 会评顺利通过
已经有10人回复
-
大龄残疾硕士的一点执念
已经有16人回复
-
刑法学论文投稿求助
已经有5人回复
-
Journal of Environmental Chemical Engineering
已经有3人回复
-
最后一年，祈求好运
已经有3人回复
-
风电环氧领域
已经有3人回复
-
售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急
已经有4人回复
-
植酸TLC薄层色谱爬板
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
实验室技术孵化和中试技术转让
+1/1981
-
filecode有几个（（JTJC））
+1/566
-
宝宝起名
+1/475
-
27年入学博士招生（图像智能处理相关）
+1/189
-
辽宁惟则专利所2026年招聘公告（沈阳本地、有经验）
+1/175
-
华中科技大学牛冉研究员课题组诚招硕士研究生、研究助理、博士研究生以及博士后
+1/76
-
中国医学科学院苏州系统医学研究所胡士斌课题组科研助理招聘
+1/50
-
以色列理工-生物质塑料等催化或多相反应方向2-3名---全奖博士研究生和科研助理
+2/44
-
求助USP <1664> 2026版本 Assessdrproduct
+1/40
-
祈祷面上基金能中
+1/34
-
四川大学华西医院高瞻课题组诚聘博后、博士/硕士生及科研助理 （柔性医疗电子）
+1/32
-
沈阳农业大学招聘微生物酶工程方向博士！！！！！！！！！！！！！
+1/31
-
研究所招聘科研/实验助理一名
+1/26
-
南科大活性流体和软物质课题组诚招2027级博士、硕士研究生和博后
+1/26
-
圣路易斯华盛顿大学管建均教授课题组招聘博士后（2名）
+1/17
-
量子化学软件开发工程师-深圳
+1/12
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/11
-
应聘机构化学教师，急用
+1/10
-
赫尔辛基大学Hematoscope Lab招PhD
+1/2
-
《财经管理》
+1/1
4楼2011-10-04 13:30:32
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
5楼2011-10-04 15:09:14