| 查看: 4239 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
焦虑
已经有13人回复
-
一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂
已经有8人回复
-
0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章
已经有9人回复
-
346求调剂[0856]
已经有5人回复
-
285化工学硕求调剂（081700）
已经有11人回复
-
267一志愿南京工业大学0817化工求调剂
已经有9人回复
-
274求调剂
已经有6人回复
-
求材料调剂
已经有10人回复
-
本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂
已经有4人回复
-
国自科面上基金字体
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
本子终于提交了。不用再看了，一切闲下来慢慢等。希望一切顺利！
+1/662
-
山东征女友，坐标济南
+1/165
-
电力全国重点实验室双一流A类长江学者团队招2026年全日制博士1名（4月3日截止）
+2/100
-
专业技术开发及第三方检测
+1/87
-
物理学 调剂
+1/84
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室
+1/39
-
北京航空航天大学招生微流控与智能打印技术方向博士研究生
+2/22
-
浙江中医药大学副校长团队招聘药学/生物信息学等方向高校教师7名，报名通道已开启
+1/20
-
【预硕】【预博】青岛大学生物医药创新转化
+1/16
-
重庆文理学院化学与环境工程学院 2026 届硕士研究生调剂通知
+1/16
-
国家级领军人才团队高分子材料方向2026年博士研究生招生
+1/15
-
北京某研究院生物化学与分子生物学相关专业申请考核制博士招生（春季）
+1/14
-
26年申博自荐-计算机视觉
+1/7
-
上海第二工业大学-朱大海课题组招生（过线就能调剂）
+1/5
-
镇江托尔化学有机合成研发岗位工作机会
+1/4
-
武汉纺织大学杰青团队招研究生（材料，化学，高分子，化工）
+1/4
-
“机械、材料”招生
+1/3
-
课题组招收环境及相关专业调剂硕士研究生（欢迎优秀学生加入）
+1/2
-
西安交通大学生命学院智能化诊疗装备研究中心2026年博士生招生
+1/1
-
【2026年春季补录】厦门大学田中群院士/易骏教授纳米光子学团队招收2026年入学博士生
+1/1
18楼2022-08-05 00:19:55
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32
