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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

物质鉴定(金币+10): 谢谢,你的建议对我很重要 2011-10-04 13:03:18
1949stone(MolEPI+1): 鼓励 2011-10-04 14:13:46
就是这样了。内参基因是需要的,用于校正样品量的差异。
附件是个人认为比较好的一个荧光定量PCR的PPT,本版里有一个关于荧光定量PCR的热门资源,感兴趣也可以看看:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3234286&fpage=1

祝假期愉快,一切顺利!
2楼2011-10-03 17:38:00
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智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

【答案】应助回帖

物质鉴定(金币+10): 谢谢,你的建议对我很重要 2011-10-04 12:59:45
1949stone(MolEPI+1): 鼓励 2011-10-04 14:13:56
呵呵 你那个方法不需要用到内参的
    因为你用的是拿一个位置的菌量作为参照,我建议你不要使用相对定量的方法,因为国际上这样做是很少的,如果你想发好一点的文章建议你做成绝对定量
    方法是将你需要的基因克隆到T载体里面,摇细菌提质粒DNA,然后通过分光光度计计算出质粒DNA的质量,由于你使用T载体的分子量和你克隆的片段分子量是知道的,所以你能求出某浓度溶液中目的基因的拷贝数。通过稀释加上qPCR能得到一个ct值的标准曲线。利用这个标准曲线去计算你各个位置DNA浓度,这样貌似比较科学。
可以用QQ找我……
3楼2011-10-04 12:39:57
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