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物质鉴定

金虫 (正式写手)

[求助] 相对定量荧光PCR求助

本人刚接触分子,想请教各位牛人有关实时定量荧光PCR的一些问题。我要做不同土壤位点某类微生物的相对量的多少,所以想做相对定量PCR,初步的实验思路如下:
1提取各位点土壤中的DNA。
2实时荧光PCR。将某位点的DNA连续稀释7个10倍梯度,设定DNA的终拷贝数分别为100-10-7n/ul,用来做相对定量的标曲
3.已知这类微生物的特征基因A,用A基因扩增引物扩增上步中不同稀释倍数DNA中的A基因及其他位点样品的A基因。设定阈值,通过Ct值计算出各位点中A基因模板的相对拷贝数,从而得出各位点某类微生物的相对多少
不知道我的想法是不是对的?请各位指教,我会虚心接受大家的意见。另外我看好多有要管家基因,我这里需要管家基因嘛?
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