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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR验证稳转细胞株中转染进去的基因序列
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] PCR验证稳转细胞株中转染进去的基因序列

最近要验证一下稳转株内是否整合了正确的基因序列，
有人说得抽提RNA作RT-PCR。
有没有什么好的办法把细胞简单处理，使基因组DNA游离出来作为模板，用特异性引物直接PCR？有人这么成功过吗。
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1楼2011-09-29 09:30:56
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

western检测也可 以啊     就是麻烦
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6楼2011-09-29 14:01:51
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gongeleven(金币+2): 2011-09-29 10:38:20
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-09-29 13:34:25
直接做southern不就好了么……
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
2楼2011-09-29 09:46:42
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-29 09:46:42:
直接做southern不就好了么……

southern可以知道精确的序列码
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3楼2011-09-29 10:36:10
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 感谢推荐~~ 2011-09-29 13:35:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-29 09:46:42:
直接做southern不就好了么……

southern单拷贝的样品拉侧翼（有takara的盒子）或者做反向PCR都可以
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
4楼2011-09-29 10:42:54
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