24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2070  |  回复: 5

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] PCR验证稳转细胞株中转染进去的基因序列

最近要验证一下稳转株内是否整合了正确的基因序列,
有人说得抽提RNA作RT-PCR。
有没有什么好的办法把细胞简单处理,使基因组DNA游离出来作为模板,用特异性引物直接PCR?有人这么成功过吗。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gongeleven(金币+2): 2011-09-29 10:38:20
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-09-29 13:34:25
直接做southern不就好了么……
显微镜下的世界很精彩!
2楼2011-09-29 09:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-29 09:46:42:
直接做southern不就好了么……

southern可以知道精确的序列码
3楼2011-09-29 10:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 感谢推荐~~ 2011-09-29 13:35:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-29 09:46:42:
直接做southern不就好了么……

southern单拷贝的样品拉侧翼(有takara的盒子)或者做反向PCR都可以
显微镜下的世界很精彩!
4楼2011-09-29 10:42:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 很耐心~鼓励~ 2011-09-29 13:35:01
gongeleven(金币+1): 谢谢。以后试试,不过这次来不及订购新试剂了。。 2011-09-29 14:08:49
gongeleven(金币+2): 2012-02-22 10:31:22
因为你本身就是为了验证插入序列是否正确的插入,所以,做southern的探针就是用你的插入序列的一部分做的,杂交有结果说明插入序列整合到了基因组上,完了你在拉侧翼序列,拿到插入序列两端的序列,再返回拉一下就知道是否完全插入正确了……或者你直接做敲除互补也能验证
显微镜下的世界很精彩!
5楼2011-09-29 10:45:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

western检测也可 以啊     就是麻烦
6楼2011-09-29 14:01:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gongeleven 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +12 努力奋斗112 2026-04-06 13/650 2026-04-07 23:49 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +11 柒luck 2026-04-07 11/550 2026-04-07 22:59 by lbsjt
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +19 披星河 2026-04-04 19/950 2026-04-07 15:00 by 上岸快快
[考研] 287求调剂 +3 通信学硕081000 2026-04-03 4/200 2026-04-06 21:03 by going home
[考研] 332求调剂 +17 小小孟... 2026-04-05 18/900 2026-04-06 09:51 by 蓝云思雨
[考研] 化学357分,考研调剂 +11 .Starry. 2026-04-04 12/600 2026-04-06 06:28 by houyaoxu
[考研] 348求调剂 +3 车厘子zzz 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:30 by 啵啵啵0119
[考研] 298求调剂 +3 manman511 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:09 by kk112233
[考研] 275求调剂 +16 waltzh 2026-04-01 16/800 2026-04-05 17:14 by Hdyxbekcb
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 323分(计算机视觉和大模型项目)能直接上手 +3 chaoxiicy 2026-04-01 3/150 2026-04-05 00:50 by chongya
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 一志愿沪9,求生物学调剂,326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
[考研] 326分求调剂 +3 于是乎呢 2026-04-01 5/250 2026-04-03 14:23 by 于是乎呢
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +3 osbbx 2026-04-02 3/150 2026-04-03 07:47 by cc8418
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突, 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:16 by 兔突突突,
[考研] 一志愿北交大材料工程,总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
信息提示
请填处理意见