应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR验证稳转细胞株中转染进去的基因序列
51/1返回列表
查看: 2082  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] PCR验证稳转细胞株中转染进去的基因序列

最近要验证一下稳转株内是否整合了正确的基因序列，
有人说得抽提RNA作RT-PCR。
有没有什么好的办法把细胞简单处理，使基因组DNA游离出来作为模板，用特异性引物直接PCR？有人这么成功过吗。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-29 09:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-29 09:46:42:
直接做southern不就好了么……

southern可以知道精确的序列码
赞一下 回复此楼
3楼2011-09-29 10:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gongeleven(金币+2): 2011-09-29 10:38:20
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-09-29 13:34:25
直接做southern不就好了么……
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
2楼2011-09-29 09:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 感谢推荐~~ 2011-09-29 13:35:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-29 09:46:42:
直接做southern不就好了么……

southern单拷贝的样品拉侧翼（有takara的盒子）或者做反向PCR都可以
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
4楼2011-09-29 10:42:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 很耐心~鼓励~ 2011-09-29 13:35:01
gongeleven(金币+1): 谢谢。以后试试，不过这次来不及订购新试剂了。。 2011-09-29 14:08:49
gongeleven(金币+2): 2012-02-22 10:31:22
因为你本身就是为了验证插入序列是否正确的插入，所以，做southern的探针就是用你的插入序列的一部分做的，杂交有结果说明插入序列整合到了基因组上，完了你在拉侧翼序列，拿到插入序列两端的序列，再返回拉一下就知道是否完全插入正确了……或者你直接做敲除互补也能验证
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
5楼2011-09-29 10:45:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿2110，化学学硕310分，本科重点双非求调剂 +18 努力奋斗112 2026-04-08 18/900 2026-04-09 23:28 by wolf97
[考研] 材料类284调剂 +32 想换手机不想解� 2026-04-08 37/1850 2026-04-09 23:20 by parmtree
[考研] 计算机类求调剂，22408-274分 +5 上岸de小虫 2026-04-09 6/300 2026-04-09 20:48 by xujun0624
[考研] 269求调剂 +9 啊啊我我 2026-04-07 9/450 2026-04-09 20:17 by 小瑶楠南
[考研] 287求调剂 +12 Fnhc 2026-04-07 18/900 2026-04-09 19:46 by vgtyfty
[考研] 292求调剂 +8 笑笑袁 2026-04-09 8/400 2026-04-09 18:14 by 1753564080
[考研] 332，085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 本科郑州大学，一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +5 祁柒连 2026-04-06 5/250 2026-04-09 09:27 by wj165256
[考博] 申博 +8 IQwQl 2026-04-04 8/400 2026-04-08 09:43 by 0608104024
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 334分机械专硕求调剂 +3 蛋花紫菜汤 2026-04-03 3/150 2026-04-07 14:49 by 逍遥cocoa
[考研] 一志愿华中农业大学0710（A）初试329分 求调剂 +5 一名26考研生 2026-04-04 5/250 2026-04-07 08:54 by 18828373951
[考研] 341求调剂 +3 学无止境，冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 一志愿重庆大学085404，总分314分，求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:46 by 欣喜777
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭