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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求教：随机序列PCR产物 PAGE和琼脂糖电泳问题
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weimei0110

金虫 (小有名气)

[求助] 求教：随机序列PCR产物 PAGE和琼脂糖电泳问题

各位高手，我的问题是这样的：
PCR模板为一段单链人工合成的DNA序列，107个碱基，中间70个是随机序列。经过PCR之后，得到约130bp左右的序列（5‘引物有启动子）。但是同样的PCR产物在8%的非变性PAGE里和2%的琼脂糖中条带位置差别很大，PAGE里大概在250bp附近，琼脂糖中大概在130bp附近。重复试验很多次，都是这样的结果。请问各位，可能是什么原因呢？

M1是takara20bp的小分子DNAmarker，M2是takaraDL2000的marker，2号是原来的一个随机样品，在两份胶中位置一样，样品泳道是我的PCR样品。
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1楼 2011-09-23 09:56:05
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 2011-09-24 18:02:24
weimei0110(金币+8): 好吧好吧 我去跑一个好的再看看，怎么才能避免顺斜呢？两遍点上loading buffer? 2011-09-25 13:16:41
一顺斜，marker 就不准了，前面的孔跑得快，后面的跑得慢，跑直了，可能就差不多了。
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真相是最大的奢侈品
5楼2011-09-24 17:40:25
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weimei0110

金虫 (小有名气)
自己顶下  还望高手多多指点啊
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2楼2011-09-23 10:39:14
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

weimei0110(金币+2): 嘻嘻 顺斜有影响吗? 2011-09-24 16:21:40
你那个PAGE胶跑得一顺斜
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真相是最大的奢侈品
4楼2011-09-24 08:31:27
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