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tyraeljoe

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-09-15 12:58:36
可能原因:
1.浓缩胶中跑得如何,也弥散么?
2.配置凝胶的溶液pH或纯度问题;
3.蛋白样品问题,我们曾经出现过同一批提取的蛋白唯独某一管每次都出现弥散;
4.胶看上去弥散了,最终显影后条带如何?也是弥散的么。
5.我们在使用某I公司的Marker的时候就是会出现弥散,某F公司的Marker条带就一直表现良好。
7楼2011-09-15 00:35:31
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普通回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

有图吗?
2楼2011-09-13 09:45:45
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博杰冲

金虫 (小有名气)

电压的问题
3楼2011-09-13 10:15:23
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lhczj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励参与 2011-09-15 12:57:41
我以前做过,现象和你差不多,我那次的原因是因为溶液没有过滤,希望对你有好处,如果同样的溶液跑出来好多过可以排除没有滤掉原因。
4楼2011-09-14 15:37:28
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会思想的芦苇

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-09-15 12:57:56
SHIXIA1314(金币+2): 已经证实是RUNNING BUFFER的问题,谢谢 2011-09-17 08:18:22
几个可能的原因:电泳缓冲液pH是8.3;SDS不纯;样品有颗粒;配胶玻璃板不干净;
从你的问题来看,SDS不纯最为可能。
5楼2011-09-14 19:04:35
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+4): 欢迎交流 2011-09-15 12:58:15
1,建议你上样前充分离心,然后取上清上样
2,如果是做超表达之类的检测,能少上样就少上样
3,配制胶的时候所有试剂要过滤,看看有没有长毛儿的
4,试剂要混匀,一般现配现用
5,玻璃板洗干净

一般要是跑胶问题的话,就这几个了
致良知
6楼2011-09-14 21:55:13
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

原来跑12%的胶,M老是少条带,现在换15%的胶,效果比那个要好~
上班族,学习ing……
8楼2011-09-15 10:15:25
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rivers_123

铁虫 (小有名气)

胶的浓度,还有胶的交联度
9楼2011-09-21 19:18:24
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 会思想的芦苇 at 2011-09-14 19:04:35:
几个可能的原因:电泳缓冲液pH是8.3;SDS不纯;样品有颗粒;配胶玻璃板不干净;
从你的问题来看,SDS不纯最为可能。

难道玻璃板脏点也会影响跑胶吗?我想问问我配的30%聚丙烯酰胺的时候发现甲叉溶解的不太好,后来我过滤了做胶也能做,只是这几次跑的都不太好,弥散的严重,还有一个问题是,我的条带宽窄不一样,有的太宽,跟溶解蛋白时的溶液有关吗?万分感谢了
10楼2011-12-03 12:14:42
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