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慈铠戟_

银虫 (小有名气)

电泳缓冲液PH不对,或是电泳缓冲液没有混匀,还有就是样品蛋白已降解·····
11楼2011-12-08 17:24:36
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红薯姐姐

新虫 (小有名气)

可以改用电流控制,浓缩的时候样品每孔1mA,分离的时候加倍。试试看
在婚姻的围城外,在感情的时差里
12楼2011-12-29 10:45:30
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zyb880117

金虫 (正式写手)

可能是你制的胶有问题,小心制胶确保没问题,如果再跑,仍然弥散,那就是电泳buffer的问题,电泳buffer跑大概四五次后就不能重复跑了,次数跑多了也会弥散的。
希望对你有用
13楼2011-12-29 16:05:40
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rice1007

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

14楼2011-12-29 19:46:24
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kelly9890501

新虫 (初入文坛)

连marker都没跑好的话,最有可能是配胶有问题~胶配好后,应该用移液枪将它混合均匀后,再加入到玻璃板内,不然各处的浓度大小不一致,有可能会影响条带的分布。分离胶配完后,最好用异丙醇压,这样更加平整。
15楼2011-12-29 20:34:37
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coh2lxx

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-09-14 21:55:13:
1,建议你上样前充分离心,然后取上清上样
2,如果是做超表达之类的检测,能少上样就少上样
3,配制胶的时候所有试剂要过滤,看看有没有长毛儿的
4,试剂要混匀,一般现配现用
5,玻璃板洗干净

一般要是跑 ...

我最近也在做SDS-PAGE,条带总是跑得不理想。我想问一下,是否配制胶所用的试剂必须过滤啊。谢谢指教。
另外,不知您是否有这方面比较成熟的方法和心得。还望不吝赐教。!!!!
16楼2012-01-04 21:04:23
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quiller2000

木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by coh2lxx at 2012-01-04 21:04:23:
我最近也在做SDS-PAGE,条带总是跑得不理想。我想问一下,是否配制胶所用的试剂必须过滤啊。谢谢指教。
另外,不知您是否有这方面比较成熟的方法和心得。还望不吝赐教。!!!!

我所在的课题组使用的PAGE是商品化的,如果是自己配的,就需要过滤
另外,SDS或其它的实际,放在常温下,时间长了可能有一些东西,这个时候需要过滤一下

一般而言,SDS-PAGE还是很成熟的。
致良知
17楼2012-01-04 23:07:33
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coh2lxx

银虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-01-04 23:07:33:
我所在的课题组使用的PAGE是商品化的,如果是自己配的,就需要过滤
另外,SDS或其它的实际,放在常温下,时间长了可能有一些东西,这个时候需要过滤一下

一般而言,SDS-PAGE还是很成熟的。

谢谢您!学了很多!以后又问题了再请教。
18楼2012-01-06 01:21:26
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Hannet

金虫 (正式写手)

盐浓度高也会导致弥散
19楼2012-01-09 19:17:20
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一实不二

金虫 (小有名气)

引用回帖:
1466213楼: Originally posted by dhmdddd at 2011-09-15 10:15:25
原来跑12%的胶,M老是少条带,现在换15%的胶,效果比那个要好~

我最近跑的条带都是最下面的分不开,M分子量小于25的消失了,我配的胶也是12% ,想问问你也是这种情况,然后换15%的就好了么 ?谢谢
20楼2012-06-05 09:53:06
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