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慈铠戟_

银虫 (小有名气)
电泳缓冲液PH不对，或是电泳缓冲液没有混匀，还有就是样品蛋白已降解·····
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11楼2011-12-08 17:24:36
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红薯姐姐

新虫 (小有名气)
可以改用电流控制，浓缩的时候样品每孔1mA，分离的时候加倍。试试看
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在婚姻的围城外，在感情的时差里
12楼2011-12-29 10:45:30
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zyb880117

金虫 (正式写手)
可能是你制的胶有问题，小心制胶确保没问题，如果再跑，仍然弥散，那就是电泳buffer的问题，电泳buffer跑大概四五次后就不能重复跑了，次数跑多了也会弥散的。
希望对你有用
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13楼2011-12-29 16:05:40
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rice1007

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
14楼2011-12-29 19:46:24
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kelly9890501

新虫 (初入文坛)
连marker都没跑好的话，最有可能是配胶有问题～胶配好后，应该用移液枪将它混合均匀后，再加入到玻璃板内，不然各处的浓度大小不一致，有可能会影响条带的分布。分离胶配完后，最好用异丙醇压，这样更加平整。
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15楼2011-12-29 20:34:37
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coh2lxx

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-09-14 21:55:13:
1，建议你上样前充分离心，然后取上清上样
2，如果是做超表达之类的检测，能少上样就少上样
3，配制胶的时候所有试剂要过滤，看看有没有长毛儿的
4，试剂要混匀，一般现配现用
5，玻璃板洗干净

一般要是跑 ...

我最近也在做SDS-PAGE，条带总是跑得不理想。我想问一下，是否配制胶所用的试剂必须过滤啊。谢谢指教。
另外，不知您是否有这方面比较成熟的方法和心得。还望不吝赐教。！！！！
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16楼2012-01-04 21:04:23
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quiller2000

木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by coh2lxx at 2012-01-04 21:04:23:
我最近也在做SDS-PAGE，条带总是跑得不理想。我想问一下，是否配制胶所用的试剂必须过滤啊。谢谢指教。
另外，不知您是否有这方面比较成熟的方法和心得。还望不吝赐教。！！！！

我所在的课题组使用的PAGE是商品化的，如果是自己配的，就需要过滤
另外，SDS或其它的实际，放在常温下，时间长了可能有一些东西，这个时候需要过滤一下

一般而言，SDS-PAGE还是很成熟的。
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致良知
17楼2012-01-04 23:07:33
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coh2lxx

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-01-04 23:07:33:
我所在的课题组使用的PAGE是商品化的，如果是自己配的，就需要过滤
另外，SDS或其它的实际，放在常温下，时间长了可能有一些东西，这个时候需要过滤一下

一般而言，SDS-PAGE还是很成熟的。

谢谢您！学了很多！以后又问题了再请教。
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18楼2012-01-06 01:21:26
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Hannet

金虫 (正式写手)
盐浓度高也会导致弥散
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19楼2012-01-09 19:17:20
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一实不二

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1466213楼: Originally posted by dhmdddd at 2011-09-15 10:15:25
原来跑12%的胶，M老是少条带，现在换15%的胶，效果比那个要好~

我最近跑的条带都是最下面的分不开，M分子量小于25的消失了，我配的胶也是12% ，想问问你也是这种情况，然后换15%的就好了么 ？谢谢
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20楼2012-06-05 09:53:06
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