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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双向电泳提总蛋白，如何除盐啊？
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hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳提总蛋白，如何除盐啊？

我用TCA丙酮沉淀法，提的肌肉总蛋白，电压一直上不去，想除盐，用什么方法好啊
注释：除盐步骤到了1000V,升压的时候没到4000V.
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1楼2011-09-11 16:06:43
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liqin1013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-15 18:29:56
你是用得7cm教条么？  你可以通过搭盐桥、透析、或者总蛋白溶解时总体积加大来达到稀释盐离子浓度的目的，这些是比较简单的方法。
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2楼2011-09-15 14:09:14
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hrjxx(金币+1): 其实我是想知道传统方法哪一个效果好啊 2011-09-17 11:18:26
用纯化试剂盒除盐效果会好点
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一切开始于结束之后
3楼2011-09-15 16:48:04
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们以前楼上有用tca沉淀她们做的是植物蛋白，最后用的是考染，酷似效果还可以
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一切开始于结束之后
4楼2011-09-17 11:45:09
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hellolin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hrjxx(金币+1): 这个是裂解以后，然后用TCA沉淀吗？ 2011-09-18 18:35:40
蛋白用TCA沉淀偶，多用丙酮洗几遍
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scienceguy
5楼2011-09-17 14:35:25
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hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hellolin at 2011-09-17 14:35:25:
蛋白用TCA沉淀偶，多用丙酮洗几遍

这个TCA沉淀是制备时候，还是提出来裂解以后再用TCA沉淀啊 ？？请指教啊
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6楼2011-09-18 18:36:36
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hellolin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hrjxx at 2011-09-18 18:36:36:
这个TCA沉淀是制备时候，还是提出来裂解以后再用TCA沉淀啊 ？？请指教啊

裂解后用tca沉淀，然后用丙酮沉淀，不过tca和丙酮都要加DTT
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scienceguy
7楼2011-09-18 19:16:06
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hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hellolin at 2011-09-18 19:16:06:
裂解后用tca沉淀，然后用丙酮沉淀，不过tca和丙酮都要加DTT

非常感谢啊，请问下如果用含10%TCA的丙酮沉淀吗，会不会效果更好啊？？？
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8楼2011-09-18 19:51:50
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hellolin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hrjxx at 2011-09-18 19:51:50:
非常感谢啊，请问下如果用含10%TCA的丙酮沉淀吗，会不会效果更好啊？？？

都可以吧，感觉没太大差别吧，不过标准的好像就是含10%TCA的丙酮
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scienceguy
9楼2011-09-18 20:00:12
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hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hellolin at 2011-09-18 20:00:12:
都可以吧，感觉没太大差别吧，不过标准的好像就是含10%TCA的丙酮

恩，谢谢啊
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10楼2011-09-28 11:07:43
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