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380218013

金虫 (小有名气)

[求助] 关于酶切的小问题

小弟想问:够质粒的时候,酶切时间长点可以吗??比如37度4-5小时的,我可否过夜?多试验有影响吗??

谢谢!
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
380218013(金币+2): 多谢姐姐 2011-09-06 16:40:49
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-09-12 07:24:22
如果没有Star活性的话,过夜也没有问题的,如果有而且没法避免的话最好不要过夜。那样的话会切的很乱,姐姐我是深受其害呀,后面吸取教训了,浪费了整整两管的酶。
4楼2011-09-06 09:23:11
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lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-05 18:39:06
没有太大影响,我曾经过夜酶切,但是效果一样的,本人感觉没有必要那么长时间,两小时足够了
我不管你看起看不起我,我都是个演员
2楼2011-09-05 17:47:33
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 是的,时间长了会产生非特异酶切 2011-09-05 21:32:03
过夜就没必要吧,一般2-3h就够了。长时间也不好,会降解的。
3楼2011-09-05 21:25:37
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莎莎乐happy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励回帖 2011-09-06 16:25:10
单酶切我一般切2.5h,双酶切4h,时间长点儿也没关系,有星号活性的除外。我有一次做试验,SacI单酶切3min,质粒都能被切开。
5楼2011-09-06 15:23:02
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