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380218013

金虫 (小有名气)

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[求助] 关于酶切的小问题

小弟想问：够质粒的时候，酶切时间长点可以吗？？比如37度4-5小时的，我可否过夜？多试验有影响吗？？

谢谢！

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1楼 2011-09-05 17:19:10

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瓶儿花

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 是的，时间长了会产生非特异酶切 2011-09-05 21:32:03

过夜就没必要吧，一般2-3h就够了。长时间也不好，会降解的。

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3楼2011-09-05 21:25:37

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lixingliang

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-05 18:39:06

没有太大影响，我曾经过夜酶切，但是效果一样的，本人感觉没有必要那么长时间，两小时足够了

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我不管你看起看不起我，我都是个演员

2楼2011-09-05 17:47:33

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shuanyu0202

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★ ★ ★
380218013(金币+2): 多谢姐姐 2011-09-06 16:40:49
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-09-12 07:24:22

如果没有Star活性的话，过夜也没有问题的，如果有而且没法避免的话最好不要过夜。那样的话会切的很乱，姐姐我是深受其害呀，后面吸取教训了，浪费了整整两管的酶。

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4楼2011-09-06 09:23:11

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莎莎乐happy

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★
wanhscn(金币+1): 鼓励回帖 2011-09-06 16:25:10

单酶切我一般切2.5h，双酶切4h，时间长点儿也没关系，有星号活性的除外。我有一次做试验，SacI单酶切3min，质粒都能被切开。

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5楼2011-09-06 15:23:02

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