| 查看: 2393 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
yesucao木虫 (正式写手)
|
[求助]
连接后转化子PCR出现非特异性的条带
|
|
|
实验主要内容： 1、将目的基因和已经连有启动子的载体连接，挑单菌落PCR验证是否含有目的条带 2、挑取能 P 出条带的单菌落，摇菌，保藏，提质粒 3、用提取的质粒，再次PCR验证是否含有启动子基因 问题： PCR验证是否含有启动子的时候，跑胶结果显示：除了自己的启动子条带，还出现2条非特异性的条带，但是阳性对照只有一条，之前一直是用这个体系，出现这样的问题，很怕是自己摇菌的过程中出现污染所致。 还请各位帮忙分析一下。 目前本人已经在做质粒的单双酶切验证，结果没出来。 如图 左一：阳性对照（启动子条带1000bp多一点） 右一：Marker（4500、3000、2000、1200、800、500、200） 其他全部是质粒PCR（每个做了两个平行，一共7个） |
回复此楼» 猜你喜欢
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有156人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 菌落PCR无条带
已经有19人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- RT后扩增到的条带出现非特异性，该如何处理
已经有4人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- PCR非特异性扩增
已经有6人回复
- 【求助/交流】PCR产物电泳条带弥散？？？
已经有30人回复
- PCR后电泳，有目的条带，也有非特异性条带，可以切胶纯化进行下一步实验吗？
已经有2人回复
- 【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】做培养细胞的RT-PCR，β-actin内参出现两个条带，求原因。
已经有10人回复
- 【求助/交流】菌液PCR鉴定阳性克隆时，总出现非特异性条带
已经有8人回复
- 【求助/交流】目的基因PCR后电泳出现多条带
已经有7人回复
6楼2011-08-31 19:59:26
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10643.1
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3706
- 在线: 792小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
2楼2011-08-31 19:46:49
yesucao
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 3877.1
- 散金: 45
- 红花: 6
- 帖子: 374
- 在线: 203.4小时
- 虫号: 810829
- 注册: 2009-07-17
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2011-08-31 19:49:35
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10643.1
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3706
- 在线: 792小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
4楼2011-08-31 19:51:34
