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yesucao木虫 (正式写手)
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连接后转化子PCR出现非特异性的条带
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实验主要内容： 1、将目的基因和已经连有启动子的载体连接，挑单菌落PCR验证是否含有目的条带 2、挑取能 P 出条带的单菌落，摇菌，保藏，提质粒 3、用提取的质粒，再次PCR验证是否含有启动子基因 问题： PCR验证是否含有启动子的时候，跑胶结果显示：除了自己的启动子条带，还出现2条非特异性的条带，但是阳性对照只有一条，之前一直是用这个体系，出现这样的问题，很怕是自己摇菌的过程中出现污染所致。 还请各位帮忙分析一下。 目前本人已经在做质粒的单双酶切验证，结果没出来。 如图 左一：阳性对照（启动子条带1000bp多一点） 右一：Marker（4500、3000、2000、1200、800、500、200） 其他全部是质粒PCR（每个做了两个平行，一共7个） |
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