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wanghd2826铁虫 (小有名气)
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求高手指点RNA电泳图~~~~
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第一次提RNA，用的是RNA iso plus，提取完后用普通1.2%的琼脂糖凝胶电泳跑的，电泳仪等用前均用DEPC水处理过，感觉过程中比较小心，但是结果还是不尽如人意，没有看到明显的18s 和28s，我是继续提纯呢，还是重提RNA呢，请各位提点意见~~谢谢 |
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wqj1988926
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2楼2011-08-20 09:07:11
wanghd2826
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6楼2011-08-21 09:19:23
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7楼2011-08-21 17:36:16
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我提的是昆虫的RNA，应该是过程中降解的太厉害了，但是又找不出到底什么原因，这几天又提了一次，还是不理想，主要是28s降解的太厉害，我把步骤贴出来希望大家看看有什么需要改进的地方。难不成是plus的问题。。。郁闷了。 1、虫体解剖+液氮研磨 2、研磨后转入1.5ml离心管+RNAiso plus 1.ml 充分混匀 3、室温静置5min，4度12000rpm离心5min 4、取上清进入新tube，加1/5体积的氯仿（200ul)，震荡混匀 5、室温静置5min，4度12000rpm离心5min 6、取上清进入tube，加入等体积异丙醇，混匀。 7、室温静置10min，4度12000rpm离心10min 8、弃上清，向沉淀中加入1ml 75%冰冻乙醇清洗沉淀，4度12000rpm 离心10min 9、干燥沉淀 加入20ul DEPC水 取5ul进行电泳 |
8楼2011-08-26 08:56:27
wanghd2826
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9楼2011-08-26 09:02:47
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10楼2011-08-26 17:25:43
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