24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 7069  |  回复: 41
本帖产生 3 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

geek23

木虫 (小有名气)

[求助] WB检测磷酸化蛋白

各位大侠,有用过CST的磷酸化抗体检测磷酸化蛋白的吗?请问在整个提蛋白以及WB过程中有什么注意事项?小女最近做了几个抗体都没有条带.急~~~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物学资料 蛋白质生物学实验经验 分子生物学

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Bethechangeyouwishtosee.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingyuansw20

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
adslye(金币+3): 认真的回复,感谢您~祝顺利! 2011-08-17 10:31:21
引用回帖:
3楼: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-08-15 16:48:37:
CST的抗体应该不错,但不知你的是单克隆还是多克隆,没有条带,是不是磷酸化没有形成。磷酸化有时形成的时间比较短,做实验时要严格对待。

1、看文献,看看攻略,到底你这个实验条件下什么时间,多大浓度才有最好的磷酸化。
2、可以自己摸,不同时间如6h、18h、36h、54h。四个条件分别做,找出两个时间段较好结果,然后取中间时间再试验。
3、最后能找个已经报道过的成熟的刺激条件,无论是什么药的。(阳性对照),提出蛋白看有没有磷酸化形成。排除是你wb的实验问题。要是wb没问题那就肯定是没形成磷酸化。
4、实验就是这样自己一点一点摸。
6楼2011-08-16 18:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

AZURESKY1999

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

也想做此类相关的课题,但并不是太懂,友情帮顶
2楼2011-08-15 16:26:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingyuansw20

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 鼓励交流~祝顺利! 2011-08-15 17:49:33
geek23(金币+5): 请问楼上.我主要是做药物处理后一些蛋白的表达,我一般是加药后48H提蛋白.你的意思是说缩短时间间隔吗?谢谢你的回答. 2011-08-16 16:49:42
CST的抗体应该不错,但不知你的是单克隆还是多克隆,没有条带,是不是磷酸化没有形成。磷酸化有时形成的时间比较短,做实验时要严格对待。
3楼2011-08-15 16:48:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

geek23

木虫 (小有名气)

请问楼上.我主要是做药物处理后一些蛋白的表达,我一般是加药后48H提蛋白.你的意思是说缩短时间间隔吗?谢谢你的回答.
Bethechangeyouwishtosee.
4楼2011-08-16 16:49:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-04-14 6/300 2026-04-14 23:54 by Xurambo2014
[考研] 297工科调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-13 13/650 2026-04-14 16:46 by Art1977
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 6/300 2026-04-14 16:40 by zhouxiaoyu
[考研] 335求调剂 +19 想上岸呀!! 2026-04-12 21/1050 2026-04-14 16:23 by Art1977
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +8 慕绝cc 2026-04-09 8/400 2026-04-13 14:08 by 张zhihao
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 346,工科0854求调剂,专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
信息提示
请填处理意见