应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒双酶切问题
51/1返回列表
查看: 2045  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

疯花血月

金虫 (初入文坛)

[交流] 质粒双酶切问题 已有9人参与

最近从同学那里要了pGEX-KG和pGEX-6p-1的菌液，提取质粒后双酶切鉴定一下，
分别用EcoRI/EcoRV和PstI/EcoRV做了2次双酶切，但是跑胶检测泳道内都是拖带，为什么会这样呢？我只切了1个小时。质粒也跑胶鉴定过了没有问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-14 10:26:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯花血月

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励回帖交流。 2011-08-18 17:56:34
引用回帖:
4楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-08-14 11:47:26:
期待高手解决楼主这个问题，也没碰到过！

找到问题了，因为提取质粒的菌液是BL21，后来转了DH5阿尔法酶切就可以了。实验室的人说经常这样，但是原理不详，要是有人知道原理请解释下。谢谢了。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-08-17 20:20:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
质粒量太少还是胶有问题？
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2011-08-14 11:01:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯花血月

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-08-14 11:01:58:
质粒量太少还是胶有问题？

应该不是质粒量的问题，我切20的体系检测，2次分别加了8和10ul，胶的marker很清楚，也应该不是胶的问题。所以茫然。
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-14 11:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 疯花血月 at 2011-08-14 11:44:15:
应该不是质粒量的问题，我切20的体系检测，2次分别加了8和10ul，胶的marker很清楚，也应该不是胶的问题。所以茫然。

期待高手解决楼主这个问题，也没碰到过！
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
4楼2011-08-14 11:47:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭