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btx362237729

金虫 (正式写手)

[求助] 最近纯化融合蛋白,请问透析需要加PMSF吗?

以前没纯化过蛋白,听说透析的时候要加PMSF,我查了一下PMSF是抑制蛋白酶的,应该是防止目的蛋白被降解咯。。。。。

而且PMSF有剧毒啊。。。

请问PMSF的量应该是加多少啊?
还有透析的时间大概是多长啊?

谢谢大家
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励下 2011-07-30 23:32:23
你的宿主是不是蛋白酶缺陷型的?

透析时间要看透析效果,透析之后测定一下透析液的电导率,如果还高就换液继续透析。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-30 21:20:22
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

电导率有仪器测的,如果你没有,就换多几次透析液。

我没加过那东西。
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4楼2011-07-30 21:33:57
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-31 17:50:21
你的蛋白质要用来做什么,为什么一定要除去某种物质,如果不影响后续实验,就不用刻意除去。透析液的选用原则是方便你的后续实验,所以不一定要用纯水,适当的离子浓度可以增加蛋白质稳定性。
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15楼2011-07-31 16:36:00
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

真牛,能做到药物。
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17楼2011-08-01 05:56:47
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