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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近纯化融合蛋白，请问透析需要加PMSF吗？
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btx362237729

金虫 (正式写手)

[求助] 最近纯化融合蛋白，请问透析需要加PMSF吗？

以前没纯化过蛋白，听说透析的时候要加PMSF，我查了一下PMSF是抑制蛋白酶的，应该是防止目的蛋白被降解咯。。。。。

而且PMSF有剧毒啊。。。

请问PMSF的量应该是加多少啊？
还有透析的时间大概是多长啊？

谢谢大家
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1楼 2011-07-30 20:22:31
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励下 2011-07-30 23:32:23
你的宿主是不是蛋白酶缺陷型的？

透析时间要看透析效果，透析之后测定一下透析液的电导率，如果还高就换液继续透析。
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2楼2011-07-30 21:20:22
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
电导率有仪器测的，如果你没有，就换多几次透析液。

我没加过那东西。
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4楼2011-07-30 21:33:57
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-31 17:50:21
你的蛋白质要用来做什么，为什么一定要除去某种物质，如果不影响后续实验，就不用刻意除去。透析液的选用原则是方便你的后续实验，所以不一定要用纯水，适当的离子浓度可以增加蛋白质稳定性。
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15楼2011-07-31 16:36:00
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
真牛，能做到药物。
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17楼2011-08-01 05:56:47
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