| 查看: 4065 | 回复: 10 | ||
[求助]
目的蛋白加myc或his标签？
|
|
最近在研究一个蛋白的表达量，但是来不及做抗体了，想直接在目的蛋白的后面l连个myc或his标签，可以直接用标签的抗体来检测目的蛋白的变化。 但是我的目的基因（蓝藻、原核生物）与它前后的基因均存在重叠的部分，如果加标签会不会影响它前后基因的功能？这种情况还能加标签吗？怎么加？ 请高手指点！我是个新虫，金币较少，请见谅！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有219人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 组氨酸标签重组蛋白纯化
已经有10人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- 大家帮忙看看我的蛋白电泳有目的带吗
已经有10人回复
- 关于用Ni-NTA His.bind树脂纯化原核表达蛋白
已经有16人回复
- 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
已经有17人回复
- 已经带his标签目的蛋白基因如何设计引物啊（目的基因已经接在pET-22b的载体上了）
已经有8人回复
- 想给自己的蛋白加个HIS标签？方法。。。。
已经有8人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- gst标签，蛋白纯化
已经有25人回复
- 原核同时表达两个蛋白，需要自行给其中一个加标签，请教了！！！
已经有4人回复
- 【求助/交流】急！急！急！ his标签表达的蛋白出问题了，求指导！！！
已经有7人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
【答案】应助回帖
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-25 20:42:46
shuihaizi(金币+2): 2011-07-25 21:58:36
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-25 20:42:46
shuihaizi(金币+2): 2011-07-25 21:58:36
|
楼主说的目的基因与它前后的基因均存在重叠是什么意思？不太明白。 以我个人的经验，可以在你目的蛋白加上标签，在标签和目的蛋白之间引入一个蛋白酶，这样你可以通过标签抗体来定表达量，然后用蛋白酶切割来研究目的蛋白。这样不仅可以定量，也可以研究蛋白性质。 具体可以再N端加上His标签，His标签与目的蛋白之前引入肠激酶。PS：比较推荐使用肠激酶的原因是肠激酶识别序列是DDDDK而发生切割是在K的后面，也就是说可以让你的目的蛋白有完整的N端，但是如果你目的蛋白序列里存在DDDDK或者DDDK或者DDK甚至DK都会发生非特异切割。如果这种情况就不建议您使用了。 貌似跑题了。。。。总之，有问题再交流 = =！ |
2楼2011-07-25 20:27:38
3楼2011-07-25 22:05:35
4楼2011-07-25 22:44:53
5楼2011-07-25 23:42:28
6楼2011-07-26 08:39:56
dasheng1980
铁杆木虫 (知名作家)
大圣
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 7702.4
- 红花: 3
- 沙发: 7
- 帖子: 8882
- 在线: 412.8小时
- 虫号: 1363851
- 注册: 2011-08-09
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2011-12-11 10:59:35
8楼2011-12-11 13:58:47
9楼2012-06-20 10:14:46
10楼2012-06-20 10:25:37
投票:
10