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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 学习了！ 2011-07-05 19:59:52
amisking(EPI+1): 鼓励应助 2011-07-05 20:04:19

不过话说回来，你为什么要先TA克隆呢？如果PCR出来之后直接将表达载体和外源片段双酶切，然后连接，再转化大肠杆菌，挑取阳性单克隆培养提质粒，这时候再测序就省事了，也不用担心你载体上的BamHI酶切位点的干扰了，这样一来整个含有你的片段的质粒上就只有一个BamHI位点了，完全没有隐患。

测序费钱也不多，一个反应就30块钱而已，但可以测定超过600bp。

而且要双向测通，因为测序是两端不准的，从单链得到的结果可能含有不准的区间，需要从另一条单链测得的结果来拼接。