| 查看: 1084 | 回复: 3 | |||
[求助]
关于质粒构建
|
| 如果构建一个重组质粒，P插入片段时上游多P了100多bp，这样的话就有可能带有基因本身的启动子，请问这样，在质粒的启动子后面还有一个启动子会不会对转录翻译有影响？谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有257人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 构建好的质粒如何防止丢失
已经有12人回复
- 关于质粒的构建
已经有17人回复
- 如何根据已有质粒构建不同开放阅读框的质粒
已经有3人回复
- 【求助/交流】构建质粒问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌转化质粒，出来的不是我要的了，怎么回事？
已经有13人回复
- 【求助/交流】构建表达质粒
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于重组质粒的构建，总是失败，希望高手指点一下啊～～
已经有16人回复
- 【求助/交流】有哪位高手指点 表达质粒 的构建
已经有7人回复
- 【求助/交流】质粒PCR产物的回收（质粒构建）
已经有11人回复
- 【求助/交流】质粒构建步骤，回答的好，还有几十金币追加！！！！
已经有13人回复
- 【求助/交流】请教质粒构建问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于质粒构建与表达的问题
已经有14人回复
cdl007
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 41
- 应助: 46 (小学生)
- 贵宾: 0.025
- 金币: 2570.6
- 红花: 11
- 帖子: 545
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 275133
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 肿瘤病因
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
wwdxx2004(金币+15): 非常感谢 很受益！ 2011-07-05 17:35:08
dhd997(金币+5): good 2011-07-05 19:15:34
wwdxx2004(金币+15): 非常感谢 很受益！ 2011-07-05 17:35:08
dhd997(金币+5): good 2011-07-05 19:15:34
|
在转录过程中，启动子的起始位点募集RNA聚合酶II，分子量 480,000， 在翻译过程中，启动子起始位点募集核糖体，核糖体（80s+60s+40s=8,000,000） 所以，尤其是核糖体具有一定的空间位阻，如果前面一个启动子募集能力强的话，核糖体先在前面一个启动子结合，后面的由于有空间位阻的情况下，第二个启动子很大几率不能起作用。如果后面一个强的话，第一个启动子将不能结合核糖体。 通常情况下，质粒上面有较强的增强原件，该启动子的活性应该比你后面加入的启动子活性强，所以，后面一个启动子不会起作用 |
2楼2011-07-05 17:09:15
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16341.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3651
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
3楼2011-07-05 18:30:54
gwbk
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 54
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2293.5
- 红花: 24
- 帖子: 529
- 在线: 186.9小时
- 虫号: 1320681
- 注册: 2011-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): good 2011-07-06 07:41:48
dhd997(金币+5): good 2011-07-06 07:41:48
|
在翻译过程中，核糖体 1，原核核糖体30s小亚基识别结合序列为SD序列，与核糖体的16srRNA富含嘌呤碱基序列结合，一般位于其实密码子上游10个碱基左右的位置。这种SD序列已经被证实是细菌中识别起始密码子的主要机制。（生物化学，王镜岩，第三版下册p527）质量2500kda 2，真核核糖体40s小亚基识别结合5'帽子结构，经过序列扫描机制，遇到第一个AUG起始合成。（细胞生物学，翟中和第三版p377）质量4800kda 3，关于空间位阻。核糖体25-30nm，碱基堆积为0.34nm，30nm可以占据将近100个核苷酸，但是其实未必。由此不能断定空间位阻影响第二个起始密码子正确起始（两个启动子间距100bp）。 4，如果以第一个启动子启动，后面第一个AUG很可能成为起始密码子，翻译蛋白有2/3的几率是移码。 5，关于质粒的增强序列。确实有质粒含有增强子，增强连锁基因的转录。但最初的质粒一般是难以控制复制数和转录量，现在经过改造的质粒多是以诱导表达型、组成型表达等类型加以控制。 |
4楼2011-07-05 21:08:55
