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qingtingzhe银虫 (正式写手)
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[求助]
请教二维电泳高手，如回答的好，另有重赏！！！！
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我现在做一株红球菌二维电泳，研究其受多环芳烃诱导的差异蛋白，通过差异蛋白寻找降解多环芳烃的降解基因。现在遇到一些问题： （1）超声破碎的功率和时间选择。由于红球菌是革兰氏阳性菌，破壁比较难，条件怎样选择？ （2）影响蛋白样品制备的因素有哪些？有哪些注意事项，例如怎么除盐，怎么尽量减少蛋白的损失。 （3）下面是我从文献中看到的方法，请提些建议： （1）收集菌体。 （2）超声破碎。 （3）除去细胞碎屑和DNA。通过一步加入精胺，290000g高速离心。 （4）通过透析除去无机盐和小分子物质。 （5）-20度保存。 |
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