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794378428

银虫 (小有名气)

[求助] 合成基因没有检测到酶活???

公司合成了一个质粒,在大肠杆菌BL21中表达,经IPTG诱导后,离心得到菌体,破碎细胞,纯化,经过SDS-PAGE能看到目的蛋白的条带,但是没有检测到酶活。不知道大家有没有遇到过这种情况,是哪个环节上可能出现了问题呢,困惑很久了,请大家提提建议
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gwbk

木虫 (正式写手)


我也合成了几条基因,¥3,生工,好贵啊,希望不会出现你这种情况。
3楼2011-07-03 22:24:04
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794378428

银虫 (小有名气)

对啊,我那个花了快3000大洋,不知道是什么情况,纠结中
4楼2011-07-04 11:12:34
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jiangyhai

金虫 (著名写手)

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-04 18:02:20
原核表达的蛋白很多是不具有活性的。不知道你的蛋白是可溶还是包涵体表达?如果是包涵体的话肯定是没有活性的。
静心做事。
5楼2011-07-04 11:40:18
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794378428

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jiangyhai at 2011-07-04 11:40:18:
原核表达的蛋白很多是不具有活性的。不知道你的蛋白是可溶还是包涵体表达?如果是包涵体的话肯定是没有活性的。

不是包涵体
6楼2011-07-04 12:42:45
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