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双酶切时间怎么确定
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苏拉的世界
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[交流]
双酶切时间怎么确定
我自己在Prok2的基础上构建的载体,用Xbal 1和BamH1双酶切,20ul的体系,要切多长时间比较合适呢,2个小时,还是三个小时?有做过的吗?指点一下
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2011-06-13 15:58:02
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苏拉的世界
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引用回帖:
Originally posted by
空谷幽风
at 2011-06-13 16:12:24:
这两个酶的最适温度都是37℃,一般酶切2h足够了,如果两个酶最适酶切温度不一样的话一定要分开酶切
俩酶一个是37度的,一个是30度的,用30度进行酶切的
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3楼
2011-06-13 17:34:06
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空谷幽风
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+1
):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-06-14 07:43:44
这两个酶的最适温度都是37℃,一般酶切2h足够了,如果两个酶最适酶切温度不一样的话一定要分开酶切
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2楼
2011-06-13 16:12:24
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lxj341401
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★ ★
苏拉的世界(金币
+1
):谢谢参与
lstt09nk(金币+1): 是的,跟酶量也有关系啊 2011-06-14 07:45:31
跟底物也就是DNA的量还有关系的。
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4楼
2011-06-13 20:26:11
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xuexue1204
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+1
):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 欢迎交流 2011-06-14 07:46:36
两个酶可以分开切的,你可以先同时切,切完跑胶看看,如果切不开的话,就分开切试试,一般不会有太大问题的
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5楼
2011-06-13 20:46:24
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