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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因克隆问题~~
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xjj5287

铁虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆问题~~

请教：一段目的基因克隆于pGEM-T easy  vector  后，经测序具有claI和xbaI酶切位点，但是进行酶切时不能切开得到目的基因，这是怎么回事？谢谢。。。
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1楼 2011-05-11 10:12:13
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by xjj5287 at 2011-05-11 10:12:13:
请教：一段目的基因克隆于pGEM-T easy  vector  后，经测序具有claI和xbaI酶切位点，但是进行酶切时不能切开得到目的基因，这是怎么回事？谢谢。。。

不知道你用的什么感受态细胞，如果是top10的话是XbaI是很容易被甲基化的，你可以先通过pcr扩增验证是否含有目的片段，然后转化JM110感受态细胞后提质粒酶切得到目的基因
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-05-11 14:28:10
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