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shenhaiwang金虫 (小有名气)
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[求助]
求助！PCR扩增不出全长DNA序列怎么办？
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| 我在做PCR时，所用引物是根据整个阅读框设计的，扩增出来的DNA理论上应该是1000bp左右，但是扩增出来的只有171bp的DNA片段，从电泳图上看，扩增条带很亮，特异性也很好；测序后发现此扩增片段跟我所要全长序列的3'端能够完全比对，并且包含下游引物序列。貌似上游引物没有扩增出任何条带，只是下游引物的单引物扩增，多次改变退火温度，结果依然如此，我下一步该怎么办呢？急切希望各位虫友出手相助，指点迷津，吾感激不尽！ |
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