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我和我自己

铁虫 (小有名气)

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[交流] 关于RT-PCR中反转录酶的问题

superscript II reverse transcriptase是什么类型的反转录酶呢？
之前用的就是M-MLV反转录酶
后来看同类的文章，用的Oligo (dt) 5-GGCCACGCGTCGACTAGTACTTTTTTTTTTTTTTTTT-3，说是锚定的oligo dt 引物……这是怎么回事……不太懂……是不是说只针对一些片段进行RT
文章中也使用的是superscript II reverse transcriptase，这个和MMLV有什么区别吗？哪家公司的这种酶比较好用呢？

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1楼 2011-05-04 15:52:22

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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

★
我和我自己(金币+1):谢谢参与

永远都用你最熟悉的体系
除非你最熟悉的体系不出结果了

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2楼2011-05-04 15:57:46

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starseacow

专家顾问 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
我和我自己(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+5): 热心 2011-05-04 17:51:50

这个酶是基于MMLV改进的，具有更好的热稳定性并降低了RNase H activity，我查到是Invitrogen产品，说明和相关链接如下

SuperScript™ II Reverse Transcriptase is an engineered version of M-MLV RT
with reduced RNase H activity and increased thermal stability. The enzyme is
purified to near homogeneity from E. coli containing the modified pol gene of
Moloney Murine Leukemia Virus (1,2). The enzyme can be used to synthesize
first-strand cDNA at higher temperatures than conventional M-MLV RT,
providing increased specificity, higher yields of cDNA, and more full-length
product. It can generate cDNA up to 12.3 kb.

具体内容可以查询以下网址
http://stanxterm.aecom.yu.edu/wi ... ch/superscript2.pdf

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3楼2011-05-04 16:33:29

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