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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这样的电泳条带能测序吗？
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chen11086

铜虫 (初入文坛)

[求助] 这样的电泳条带能测序吗？

各位虫友，帮俺看看这样的电泳条带可以测出序吗，我送了20微升的样结果说我样品浓度低，俺不知道是测序公司的事，还是我该p50微升的反应体系，还是直接就不能测出序那，谢谢啦！！
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1楼 2011-04-26 19:09:47
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chen11086

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by chen11086 at 2011-04-26 19:09:47:
各位虫友，帮俺看看这样的电泳条带可以测出序吗，我送了20微升的样结果说我样品浓度低，俺不知道是测序公司的事，还是我该p50微升的反应体系，还是直接就不能测出序那，谢谢啦！！
[eimg]8e/ad/898966_1303816129 ...

忘记说了，是最右边两个条带
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2楼2011-04-26 19:10:30
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huzhihong-

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
chen11086(金币+2): 谢谢 2011-04-26 20:40:55
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-27 13:15:47
chen11086(金币+1): 2011-04-28 15:18:33
20微升的确有点少，改为50微升应该可以测出来的！！
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3楼2011-04-26 19:50:27
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我现在还没做到测序那一部分。可是你那个亮度可以了呀，请问你上样多少？
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坚持，一秒钟，就离，成功，近一步！
4楼2011-04-27 22:08:57
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 很活跃，鼓励交流 2011-04-28 08:42:53
补充一点，只要你送去的样品里面有目的片段的话，测序公司应该可以测出来，如果量少的话，他们因该自己PCR，这些都不是你的问题了
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坚持，一秒钟，就离，成功，近一步！
5楼2011-04-27 22:12:07
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chen11086

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 蓝月望宁 at 2011-04-27 22:08:57:
我现在还没做到测序那一部分。可是你那个亮度可以了呀，请问你上样多少？

5微升，goldview染色
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6楼2011-04-28 09:24:44
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wangy0908

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
chen11086(金币+1): 2011-04-28 15:15:02
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 08:47:25
你的这个PCR的结果好像又问题的，为什么电泳会有那么明显的弥散带型的呢？
你的产物大小是你想要的吗？以及送出去测序是要求你把浓度测定出来的啊，不同大小的浓度要求不一样！
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7楼2011-04-28 09:32:59
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

切胶纯化，然后测序。。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
8楼2011-04-28 10:28:29
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yebaihe68

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
chen11086(金币+1): 2011-04-28 15:17:57
西瓜(金币+5): 鼓励交流经验+鼓励新虫参与讨论 2011-04-28 15:18:56
这样的我们都直接送的。要是说很弱的话，就再做一管咯。两管弱的加在一起，就能测出来。我们都这样做！   我说的是英俊测序哈。。不知道其他公司怎么样。。
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9楼2011-04-28 10:39:08
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chen11086

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wangy0908 at 2011-04-28 09:32:59:
你的这个PCR的结果好像又问题的，为什么电泳会有那么明显的弥散带型的呢？
你的产物大小是你想要的吗？以及送出去测序是要求你把浓度测定出来的啊，不同大小的浓度要求不一样！

我也不大清楚为什么会有弥散条带的？您能帮我分析分析吗。产物的大小不确定，目前还没有这个基因从我的实验材料扩出来的文章。是不是我设计的引物有问题涅？俺是个初学者导师一下子给我这么个实验我头都大了，什么都不确定，愁死了！！
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10楼2011-04-28 15:14:09
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