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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这样的电泳条带能测序吗？
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chen11086

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yebaihe68 at 2011-04-28 10:39:08:
这样的我们都直接送的。要是说很弱的话，就再做一管咯。两管弱的加在一起，就能测出来。我们都这样做！   我说的是英俊测序哈。。不知道其他公司怎么样。。

可以测多大片段呢一般，英俊测序？我现在测序的公司是南京金斯瑞说只能测800bp，否则就得选择测通，是所用的公司都这样，还是个别情况呐？
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11楼2011-04-28 15:17:22
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yebaihe68

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 18:42:45
引用回帖:
Originally posted by chen11086 at 2011-04-28 15:17:22:
可以测多大片段呢一般，英俊测序？我现在测序的公司是南京金斯瑞说只能测800bp，否则就得选择测通，是所用的公司都这样，还是个别情况呐？

我们都是选择测通的哦。。我们现在做的片段都是1000 bp以下，话说大于1000 bp 就不好测了。。
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12楼2011-04-28 15:25:54
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huzhihong-

新虫 (小有名气)
建议自己胶回收纯化后再送样测序！
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13楼2011-04-28 16:23:50
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wangy0908

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3, EPI+1): 鼓励！回答得很详细。 2011-04-29 07:53:04
引用回帖:
Originally posted by chen11086 at 2011-04-28 15:14:09:
我也不大清楚为什么会有弥散条带的？您能帮我分析分析吗。产物的大小不确定，目前还没有这个基因从我的实验材料扩出来的文章。是不是我设计的引物有问题涅？俺是个初学者导师一下子给我这么个实验我头都大了， ...

你是做的nest pcr还是什么的呢？你适当的在调整一下PCR的体系，减少DNTP的用量等。因为弥散太严重，测序会影响，因为产物不纯！如果你在的是多次扩增PCR，就适当稀释第一次PCR或者第二次PCR产物，在扩增的。引物问题，你先确认是否专一的，主要有一端专一就可以的。
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14楼2011-04-29 05:31:50
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chen11086

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wangy0908 at 2011-04-29 05:31:50:
你是做的nest pcr还是什么的呢？你适当的在调整一下PCR的体系，减少DNTP的用量等。因为弥散太严重，测序会影响，因为产物不纯！如果你在的是多次扩增PCR，就适当稀释第一次PCR或者第二次PCR产物，在扩增的。引 ...

我是调一段普通的基因，是从DNA水平做的，可能存在内含子，我减少dNTP的量试试吧，谢谢你，。不知道这种方法是否可行，我是我们实验室做这个方向第一个吃螃蟹的人，没有借鉴的经验，愁呀！！
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15楼2011-04-29 08:42:49
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ybQuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

切胶回收，纯化克隆
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哥在江湖漂，很少不挨刀，不是愿意挨，是哥很无奈!
16楼2011-04-29 09:17:12
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子
回收一下再去测序
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开开心心做科研，踏踏实实做好人。
17楼2012-05-04 15:41:05
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lucifer晗

铜虫 (初入文坛)
请问虫友，测序结果怎么样了，最近我也遇到相似问题。扩增出来的产物浓度不够，担心测不出来
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18楼2020-01-09 09:05:33
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