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X—Gal IPTG蓝白斑试验
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| 各位大侠好，做克隆时，涂菌前在平板上涂X—Gal 和IPTG，长出来的菌落呈白色和蓝色。我的理解是白色是含有目的片段的菌落，蓝色是不含目的片段但具有抗药基因的菌落，不含抗药基因的菌落则无法生存。但我查阅一些资料之后又发现蓝色菌落可能为假阳性，我是新手，不太明白。请各位多多指教！ |
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yabxxh
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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reasonspare(金币+2): 谢谢分享 2011-04-20 11:25:48
reasonspare(金币+1): 搂主还有问题，你再麻烦以下。 2011-04-20 11:26:39
南海所老龚(金币+1): 2011-04-26 09:21:49
reasonspare(金币+2): 谢谢分享 2011-04-20 11:25:48
reasonspare(金币+1): 搂主还有问题，你再麻烦以下。 2011-04-20 11:26:39
南海所老龚(金币+1): 2011-04-26 09:21:49
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1.蓝白斑筛选的原理我就不说了，你去查下资料 2.转化了空载体的就是你看到的蓝斑，其抗性来源于空载体；转了重组质粒的就是你看到的白斑，也就是我们的目的菌落。 3.菌落本身是没有抗药基因的，抗生素的筛选依据是根据载体来的。 4.蓝色菌落是转化了空载体的菌落，并不是我们的目的菌落，也就无所谓阳性和假阳性。倒是白斑，我们的目的菌落才是阳性，如果是白斑，但并不是我们需要的目的菌落，才称之为假阳性。 你这几个问题问的很好，说明你好好思考了。刚开始的时候我也是比较困惑这些。 希望以上能帮到你，好运。 |
2楼2011-04-20 09:26:17
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