24小时热门版块排行榜    

查看: 4936  |  回复: 7
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 原生质体转化

有虫友做过PEG介导的原生质体转化吗,为什么我在转化后加溶液终止转染之后再离心,不见原生质体沉淀了呢?谁能帮我分析分析原因,在做转化之前在显微镜下观察过原生质体,得到的原生质体蛮正常的
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwlr116812

金虫 (正式写手)

能不能请教一下你具体的原生质体的方法及所用溶液
4楼2011-04-21 10:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

新人小玥

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励发帖应助。 2011-04-19 19:49:55
不知道你做的是什么物种。
就我的经验而言,如果原生质体比较小的话,就很难收集。
我有三个办法解决:
1、加大原生质体的量,就是加MMG溶液的时候就增加原生质体浓度,这对转化效率有一定的影响,要找好之间的平衡点。
2、终止反应时加多点W5溶液,使PEG浓度更稀,原生质体容易沉。
3、延长离心的时间,也可以稍微加点转速,但是不要多,原生质体容易破。
2楼2011-04-19 19:27:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 新人小玥 at 2011-04-19 19:27:50:
不知道你做的是什么物种。
就我的经验而言,如果原生质体比较小的话,就很难收集。
我有三个办法解决:
1、加大原生质体的量,就是加MMG溶液的时候就增加原生质体浓度,这对转化效率有一定的影响,要找好之间的 ...

谢谢建议,可是你没应助,想给你发金币发不了了
3楼2011-04-20 13:02:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by zwlr116812 at 2011-04-21 10:44:00:
能不能请教一下你具体的原生质体的方法及所用溶液

参照Arabidopsis mesophyll protoplasts: a versatile cell system for transient gene expression analysis
5楼2011-04-21 13:46:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见